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首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1305CHO-K1中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系亞株


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PRODUCT CLASSIFICATION技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細(xì)介紹
來(lái)源與形態(tài):該亞株源自 CHO-K1 細(xì)胞系,通過(guò)單細(xì)胞克隆、抗性篩選或基因編輯技術(shù)獲得,純度與均一性顯著優(yōu)于母系。體外培養(yǎng)時(shí)呈典型上皮樣形態(tài),貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞呈多邊形,排列緊密且邊界清晰,形態(tài)一致性高,無(wú)明顯異質(zhì)性。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)環(huán)境中,增殖穩(wěn)定,傳代周期約 2-3 天,可適應(yīng)貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)及無(wú)血清培養(yǎng)基體系,高密度培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞存活率仍能保持在 90% 以上。
遺傳特征:核型為非整倍體,染色體數(shù)目約 20-22 條,核型穩(wěn)定性?xún)?yōu)于母系細(xì)胞,長(zhǎng)期傳代后仍能維持基因組的一致性。部分亞株通過(guò)基因改造引入特定特性,如缺失特定代謝基因(便于篩選)或整合抗性標(biāo)記(利于外源基因穩(wěn)定表達(dá)),基因組背景清晰,對(duì)外源基因的容納能力強(qiáng),轉(zhuǎn)染后可高效表達(dá)目標(biāo)蛋白。
重組蛋白高效表達(dá)
基因工程與功能研究
藥物篩選與毒性評(píng)估
優(yōu)勢(shì):遺傳均一性高,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好,批間差異??;蛋白表達(dá)效率高且穩(wěn)定,翻譯后修飾能力優(yōu)異,產(chǎn)物生物活性強(qiáng);培養(yǎng)適應(yīng)性廣,可在多種培養(yǎng)體系中高效增殖,便于實(shí)驗(yàn)室研究與工業(yè)化生產(chǎn)銜接;被 FDA、EMA 等國(guó)際監(jiān)管機(jī)構(gòu)認(rèn)可,是生物藥生產(chǎn)的合規(guī)細(xì)胞系,應(yīng)用范圍覆蓋從基礎(chǔ)研究到商業(yè)化生產(chǎn)的全鏈條。
局限性:部分亞株因基因改造可能對(duì)特定營(yíng)養(yǎng)成分有依賴(lài)(如缺失某代謝基因需外源補(bǔ)充),增加培養(yǎng)成本;懸浮培養(yǎng)時(shí)易形成小聚集體(直徑通常<100μm),可能影響蛋白分泌的均一性;與人類(lèi)細(xì)胞的糖基化模式仍存在細(xì)微差異,少數(shù)蛋白的體內(nèi)活性可能受影響,需通過(guò)培養(yǎng)基優(yōu)化或基因編輯進(jìn)一步改良。
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加青mei素 - 鏈mei素預(yù)防污染。生產(chǎn)階段多采用化學(xué)成分明確的無(wú)血清培養(yǎng)基,減少外源因子干擾,提升產(chǎn)物純度。培養(yǎng)過(guò)程中需控制溶氧(30%-50% 飽和度)、pH(7.2-7.4)及葡萄糖濃度(2-4g/L),避免營(yíng)養(yǎng)耗竭或代謝廢物積累。
污染防控:貼壁細(xì)胞易受支原體污染,需每周通過(guò) PCR 檢測(cè);凍存時(shí)使用含 10% DMSO 的凍存液,梯度降溫后保存于液氮中,復(fù)蘇時(shí) 37℃快速解凍,離心去除 DMSO 以減少細(xì)胞損傷,復(fù)蘇后傳代 1-2 次,待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后再用于實(shí)驗(yàn)。
CHO-K1 亞株的出現(xiàn)推動(dòng)了生物制藥的精準(zhǔn)化與高效化:其均一性解決了母系細(xì)胞異質(zhì)性導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差問(wèn)題,為重組蛋白生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化提供了保障;基因改造技術(shù)的融入使其能滿足特定需求(如高表達(dá)某類(lèi)蛋白),拓展了應(yīng)用場(chǎng)景。目前,全球 60% 以上的重組蛋白藥物由該亞株或其衍生株生產(chǎn),其技術(shù)原理也為其他細(xì)胞系的優(yōu)化提供了范式,成為連接基礎(chǔ)研究與產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵橋梁,持續(xù)推動(dòng)生物藥向高效、安全、低成本方向發(fā)展。
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