H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞系
H9c2(2-1)大鼠心肌細(xì)胞系在心肌疾病研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,憑借其高度模擬心肌細(xì)胞的生物學(xué)特性與功能,成為探究心肌損傷機(jī)制、評(píng)估心肌保護(hù)藥物及解析心臟生理過(guò)程的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)?zāi)P?,為心血管疾病的基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化提供了穩(wěn)定可靠的細(xì)胞平臺(tái)。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景:該細(xì)胞系源自 BD-IX 大鼠的胚胎心臟組織,經(jīng)原代培養(yǎng)與克隆篩選建立。細(xì)胞形態(tài)呈現(xiàn)典型的心肌細(xì)胞特征,未分化狀態(tài)下為長(zhǎng)梭形,經(jīng)誘導(dǎo)分化后可形成多核肌管,胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)明顯的肌原纖維,呈現(xiàn)明暗相間的橫紋結(jié)構(gòu)。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng),排列呈平行束狀或漩渦狀,傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 93%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定:倍增時(shí)間約 28-32 小時(shí),連續(xù)傳代 40 次后仍保持正常的二倍體核型(42 條染色體);心肌特異性標(biāo)志物肌鈣蛋白 T、α- 肌動(dòng)蛋白(α-Actin)免疫熒光染色呈強(qiáng)陽(yáng)性,細(xì)胞純度達(dá) 96%;無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。
科研應(yīng)用價(jià)值:在心肌缺血再灌注損傷研究中,H9c2 (2-1) 細(xì)胞經(jīng)缺氧 / 復(fù)氧處理后,乳酸脫氫酶(LDH)釋放量較正常組升高 3.2 倍,活性氧(ROS)水平增加 2.8 倍,可模擬心肌細(xì)胞在缺血再灌注過(guò)程中的氧化應(yīng)激損傷,為解析細(xì)胞凋亡信號(hào)通路提供理想模型。藥物篩選方面,該細(xì)胞對(duì) β 受體阻滯劑、心肌保護(hù)肽等藥物反應(yīng)敏感,經(jīng)特定藥物處理后,細(xì)胞存活率提升 40%,心肌酶譜指標(biāo)改善,適用于評(píng)估新型心肌保護(hù)藥物的療效與作用機(jī)制。在心肌分化研究中,細(xì)胞在 5 - 氮雜胞苷誘導(dǎo)下可表達(dá)心肌特異性轉(zhuǎn)錄因子 GATA4 和 Nkx2.5,表達(dá)量分別增加 3.5 倍和 2.7 倍,能模擬心肌細(xì)胞的分化過(guò)程,助力心臟發(fā)育機(jī)制研究。此外,將該細(xì)胞與心肌成纖維細(xì)胞共培養(yǎng),可構(gòu)建體外心肌微環(huán)境模型,用于探究心肌纖維化的細(xì)胞間相互作用機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范:推薦使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 高糖培養(yǎng)基,添加 1% 非必需氨基酸及 1% 抗生素混合液預(yù)防污染,培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次,避免代謝廢物積累。傳代時(shí)采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,待細(xì)胞邊緣回縮、間隙增大后終止消化,傳代比例為 1:4-1:6,每 3-4 天傳代一次,維持細(xì)胞融合度在 70%-80% 以保持心肌特性。凍存液配方為基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% FBS,經(jīng)程序降溫(-20℃1 小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮保存)后,復(fù)蘇細(xì)胞存活率達(dá) 90% 以上,3 代內(nèi)可恢復(fù)正常增殖與收縮功能。運(yùn)輸方式可選擇干冰凍存管或 T-25 培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸,收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 6 小時(shí),更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài),確認(rèn)無(wú)異常漂浮物后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用,禁止用于臨床診療相關(guān)研究。
H9c2 (2-1) 大鼠心肌細(xì)胞系以其穩(wěn)定的心肌表型、明確的功能特征及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì),在心肌疾病機(jī)制研究與藥物研發(fā)中發(fā)揮著不可替代的作用,為推動(dòng)心血管領(lǐng)域的科學(xué)突破與治療方案創(chuàng)新提供了有力支撐。
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